Agar Verde Brilhante Frasco 500G AG-5057 Himedia

AGAR VERDE BRILHANTE FRASCO 500G AG-5057 HIMEDIA

AG-5057 - ÁGAR VERDE BRILHANTE - MU016

USO PRETENDIDO

• Usado para o isolamento seletivo de Salmonellae, exceto Salmonella Typhi, de fezes, alimentos, laticínios, etc., de acordo com a Farmacopeia dos Estados Unidos.

COMPOSIÇÃO 

• Ingredientes (g/L)
• Peptona: 5.000
• Triptona: 5.000
• Extrato de levedura: 3.000
• Lactose: 10.000
• Sacarose: 10.000
• Cloreto de sódio: 5.000
• Vermelho fenol: 0.080
• Verde brilhante: 0.025
• Ágar: 20.000
• pH após a esterilização (a 25°C): 6.9 ±0.2
• **Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho

INSTRUÇÕES

• Suspenda 58,09g em 1000mL de água purificada/destilada. Aqueça até fervura para dissolver o meio completamente. Esterilizar em autoclave a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. EVITE O SUPERAQUECIMENTO. Esfriar a 45-50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃO

• Recomendado como meio de plaqueamento primário de para o isolamento de espécies de Salmonella. Descrito por Kristensen et al como meio para diferenciação da paratifóide B de outras bactérias entéricas Gram negativas (1). Kauffmann o modificou ainda mais para isolamento de Salmonella de amostras de fezes (2). O Ágar Verde Brilhante também é recomendado pela APHA (3,4) FDA (5) e está de acordo com a Farmacopeia dos Estados Unidos (6). Este meio é empregado em testes de amostras clínicas. Inóculos pesados e amostras altamente contaminadas podem ser analisadas devido à excelente seletividade deste meio. O Agar Verde Brilhante é usado no teste de limites microbianos e com novobiocina para testar produtos alimentícios e farmacêuticos.
• A combinação de peptona, triptona e extrato de levedura torna o meio altamente nutritivo e fornece aminoácidos e cadeias de peptídeos. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. A lactose e a sacarose são as fontes de carboidratos fermentáveis. O vermelho de fenol serve como um indicador ácido-base dando cor amarela às bactérias fermentadoras de lactose e/ou sacarose. Este meio também contém verde brilhante, que inibe o crescimento da maioria das bactérias Gram-negativas e Gram-positivas. Salmonella Typhi, espécies de Shigella, Escherichia coli, espécies de Proteus, espécies de Pseudomonas, Staphylococcus aureus são principalmente inibidos.
• No entanto, por ser altamente seletivo, recomenda-se que este meio seja utilizado juntamente com um meio menos inibitório para aumentar as chances de recuperação. Muitas vezes as culturas enriquecidas em Selenito ou Caldo Tetrationato são semeadas em Agar Verde Brilhante juntamente com Agar Sulfito de Bismuto, Agar SS, Agar MacConkey. Bactérias não fermentadoras de lactose desenvolvem colônias brancas a vermelho-rosadas dentro de 18-24 horas após a incubação. As espécies de Salmonella typhi e Shigella podem não crescer neste meio, além disso as espécies de Proteus, Pseudomonas e Citrobacter podem mimetizar patógenos entéricos produzindo pequenas colônias vermelhas.

Aparência

• Pó homogêneo de fluxo livre de amarelo claro a rosa claro
• Gelificação:
• Firme, comparável com gel de ágar a 2,0%
• Cor e clareza do meio preparado:
• Formas de gel marrom esverdeado claro a levemente opalecente em placas de Petri
• pH:
• 6.70 - 7.10
• Teste de promoção de crescimento:
• A Promoção do Crescimento foi observada de acordo com a USP.
• Resposta cultural:
• Características culturais observadas após uma incubação a 35°C -37°C durante 24-48 horas. A taxa de recuperação é considerada como 100% para crescimento de bactérias em Ágar Digestão Caseína de Soja

Organismo

• Salmonella Typhimurium ATCC 14028
• Inóculo(UFC): 50 -100
• Crescimento: Exuberante
• Valor do lote observado(UFC): 25-100
• Recuperação: >=50%
• Cor da colônia: Rosa claro

Organismo

• Salmonella Abony NCTC 6017
• Inóculo(UFC): 50 -100
• Crescimento: Exuberante
• Valor do lote observado(UFC): 25-100
• Recuperação: >=50%
• Cor da colônia: Rosa claro
• Testes Microbiológicos Adicionais

Organismo

• Salmonella Enteritidis ATCC 13076
• Inóculo(UFC): 50 -100
• Crescimento: Exuberante
• Valor do lote observado(UFC): 25-100
• Recuperação: >=50%
• Cor da colônia: Rosa claro

Organismo

• Salmonella Typhi ATCC 6539
• Inóculo(UFC): 50-100
• Crescimento: Bom
• Valor do lote observado(UFC): 15-40
• Recuperação: 30 -40 %
• Cor da colônia: Rosa avermelhado

Organismo

• Escherichia coli ATCC 25922
• Inóculo(UFC): 50 -100
• Crescimento: Pobre
• Valor do lote observado(UFC): 0-10
• Recuperação: 0-10%
• Cor da colônia: Verde amarelado

Organismo

• Escherichia coli ATCC 8739
• Inóculo(UFC): 50 -100
• Crescimento: Pobre
• Valor do lote observado(UFC): 0-10
• Recuperação: 0-10%
• Cor da colônia: Verde amarelado

Organismo

• Escherichia coli NCTC 9002
• Inóculo(UFC): 50 -100
• Crescimento: Pobre
• Valor do lote observado(UFC): 0-10
• Recuperação: 0-10 %
• Cor da colônia: Verde amarelado

Organismo

• Staphylococcus aureus ATCC 25923
• Inóculo(UFC): >=10³
• Crescimento: Inibido
• Valor do lote observado(UFC): 0
• Recuperação: 0%
• Cor da colônia: -

Organismo

• Staphylococcus aureus ATCC 6538
• Inóculo(UFC): >=10³
• Crescimento: Inibido
• Valor do lote observado(UFC): 0
• Recuperação: 0%
• Cor da colônia: -

ARMAZENAMENTO E VIDA ÚTIL

• Armazenar abaixo de 30°C em recipiente bem fechado e o meio preparado entre 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo.

REFERÊNCIAS

• 1. Kristensen M., Lester V, and Jurgens A., 1925, Brit.J.Exp.Pathol.,6:291.
• 2. Kauffman F., 1935, Seit F. Hyg. 177:26
• 3. Downes F P and Ito K. (Eds.), 2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4th ed., APHA, Washington, D.C.
• 4. Standard Methods for the Microbiological Examination of Dairy Products, 1995, 19th Ed, APHA, Washington, D.C.
• 5. Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition, Revision A, 1998. AOAC, Washington D.C.
• 6. The United States Pharmacopoeia, 2009. USP Conv. Rockville, MD.