Caldo Bile Verde Brilhante 2% Frasco 500g AG-6004 Himedia

CALDO BILE VERDE BRILHANTE 2% FRASCO 500G AG-6004 HIMEDIA

Composição**

• Ingredientes Gms / Litro
• Peptona 10.000
• Lactose 10.000
• Bile # 20.000
• Verde brilhante 0,0133
• PH final (a 25 ° C) 7,2 ± 0,2
• ** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho

# - Equivalente a Oxgall

Instruções
Suspenda 40,01 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça se necessário para dissolver completamente o meio. Distribuir na fermentação tubos contendo tubos Durhams invertidos e esterilizar em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Para preparação de força dupla, recomenda-se aquecer o caldo dissolvido (80,02 gramas por litro) a 100°C por 30 minutos.

Princípio e Interpretação
O Caldo Biliar Verde Brilhante 2% é um dos meios mais utilizados para a detecção de bactérias coliformes na água, águas residuais, alimentos e leite e produtos lácteos. Este meio é formulado de acordo com a APHA (1, 2, 3) para a presunção identificação e confirmação de bactérias coliformes (4,5). Este meio também é recomendado pelo Comitê ISO para enumeração de coliformes pela técnica do número mais provável (6). A peptona serve como fonte de nutrientes essenciais. A lactose é o carboidrato fermentável. Bile inibe bactérias gram-positivas enquanto as bactérias gram-negativas são inibidas pelo verde brilhante. Detecta produção de gás a partir da fermentação da lactose incorporando o tubo de Durham invertido, o que indica a evidência positiva de coliforme fecal, uma vez que coliformes não fecais crescendo neste meio não produz gás. Produção adicional de gás no caldo CE (M127) a 45 ° C usado como confirmação de coliforme fecal. Os formadores de esporos gram-positivos podem produzir gás se a inibição da bile ou do verde brilhante for enfraquecida pela reação com material alimentar.
Durante o exame de amostras de água, o crescimento de tubos positivos presuntivos mostrando gás no Caldo de Lactose (M026) ou Caldo Lauril-Triptose (M080) é inoculado em Caldo Biliar Verde Brilhante a 2% (M121). Formação de gás dentro de 48 ± 2 horas confirma o teste presuntivo (1).

Tipo de amostra
Amostras de alimentos e laticínios; Amostras de água

Coleta e manuseio de amostras:
Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (2).
Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes e os padrões locais. (1)
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e precauções:
Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção / vestuário de proteção / proteção ocular / facial proteção. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio das amostras. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais

Limitações:
Este meio é recomendado para identificação presuntiva, mais testes bioquímicos são necessários para confirmação.

Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado em temperatura recomendada.

Controle de qualidade
Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo creme a verde pálido
Cor e clareza do meio preparado: Solução de cor verde esmeralda, transparente, sem precipitado.
Reação: Reação de solução aquosa a 4,0% p / v a 25 ° C. pH: 7,2 ± 0,2
pH: 7.00-7.40

Resposta cultural
Características culturais observadas após uma incubação a 35-37 ° C por 18-48 horas.

Resposta cultural

Organismo: Bacillus Cereus ATCC 10876
Inoculação: >=10³
Crescimento: Inibido
GAS: -

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Bom-Exuberante
GAS: Reação Positiva

Organismo: Klebisiella aerogenes ATCC 13048 (00175*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Nenhum
GAS: Reação Negativa

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Nenhum
GAS: Reação Negativa

Organismo: Staphylococcus aureus ATCC 25923 (00034*)
Inoculação: >=10³
Crescimento: Inibido
GAS: -

Armazenamento e prazo de validade
Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 15-25°C. Use antes da data de validade em o rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar grumos formação devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços.
Armazenar em área ventilada e seca, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Fechar bem o recipiente depois de usar. Use antes da data de validade no rótulo.
O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (7,8).

Referências:
1. Greenberg A. E., Eaton A. D. e Clesceri L. S., (Eds.), 1998, Métodos Padrão para o Exame de Água e Wastewater, 20a ed., APHA, Washington, D.C.
2. Downes F. P. e Ito K. (Eds.) 2001, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos. 4th Ed, APHA, Washington DC.
3. Richardson G., (Ed.), 1985, Métodos Padrão para o Exame de Produtos Lácteos, 15a Ed, APHA, Washington, D.C.
4. McCrady e Langerin, 1932, J. Dairy Science, 15: 321.
5. McCrady, 1937, alt. J. Publ. Health, 27: 1243.
6. Organização Internacional de Normalização (ISO), 1991, Projeto de ISO / DIS 4831.
7.Isenberg, H.D. Procedimentos Clínicos de Microbiologia. 2ª Edição.
8. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1