AGAR SULFITO FERRO FRASCO 500G Ag-5043 Himedia

AGAR SULFITO FERRO FRASCO 500G AG-5043 HIMEDIA

 O Ágar Sulfito de Ferro é recomendado para a detecção de organismos anaeróbicos termofílicos que causam deterioração do sulfeto em alimentos.

Composição**
Ingredientes Gms / Litro
Hidrolisado enzimático de caseína 10.000
Sulfito de sódio 0,500
Citrato de ferro (III) 0,500
Ágar 15.000
PH final (a 25°C) 7,1 ± 0,2
** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho

Instruções
Suspenda 26 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Esterilize em autoclave em 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Princípio e Interpretação
O ágar de sulfito de ferro é uma modificação do ágar de sulfato de Cameron desenvolvido pela National Canners Association of America (1) Foi demonstrado por Beerens (2) que a concentração de sulfito a 0,1% na fórmula original era inibidora para algumas cepas de Clostridium sporogenes. Essa observação foi posteriormente confirmada por Mossel et al (3), que consequentemente mostraram que 0,05% A concentração de sulfito não foi inibidora para os organismos. A maioria dos clostrídios possui sulfito redutase em seu citoplasma, mas eles são incapazes de expulsá-los para o exterior. Então, quando o H2S é produzido a partir de sulfito, a colônia fica escura devido à formação de precipitados de sulfeto de ferro a partir de citrato.
O hidrolisado enzimático de caseína fornece nitrogênio e outros nutrientes necessários para apoiar o crescimento bacteriano. Redutor de sulfito as bactérias geralmente produzem colônias negras como resultado da redução de sulfito em sulfeto, que reage com o sal de ferro (III).

Para a detecção de organismos que causam deterioração do sulfeto, dois métodos podem ser seguidos:
a) Método de cultura de agitação profunda: distribua o meio em quantidades de 10 ml em tubos. Inocule a amostra quando o meio estiver a cerca de 50°C. Permitir definir e incubar a 55°C por 24-48 horas.
Espécies termofílicas típicas - Desulfotomaculum nigrificans, produz colônias esféricas negras distintas na profundidade do meio.
b) Método de Attenborough e Scarr (4): Nesse método, amostras diluídas de açúcar ou qualquer outro alimento são filtradas através da membrana filtros. Esses filtros são então enrolados e colocados em tubos contendo apenas ágar de sulfito de ferro (a 50°) suficiente para cobri-los.
c) O meio é deixado endurecer e depois incubado a 55-56°C por 24-48 horas. Após a incubação, o número de colônias negras o filtro de membrana é contado. Além disso, são realizados testes de confirmação para identificar o organismo que cresce no meio. A técnica de filtro de membrana é mais rápida, com precisão comparável e permite o exame de amostras maiores. O escurecimento reação é apenas evidência presumível de crescimento de clostridios. Teste de confirmação deve ser realizado para identificação. Tem muitas bactérias gram-negativas capazes de reduzir o sulfito com a produção de sulfeto de ferro neste meio, mas nesses caso as enzimas são extracelulares e todo o meio fica escuro, impossibilitando sua enumeração.

Controle de qualidade
Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a amarelo acastanhado
Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado: Formas de gel ligeiramente opalescente de cor amarela em placas de Petri
Reação: Reação de solução aquosa a 2,6% p/v a 25°C. pH: 7,1 ± 0,2
pH: 6,90-7,30

Resposta cultural
Características culturais observadas em condições anaeróbias, após incubação a 55-56°C por 24-48 horas.

Resposta cultural
Organismo:Clostridium botulinum ATCC 25763
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia: Preto

Organismo:Clostridium butyricum ATCC 13732
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia: Preto

Organismo: Clostridium sporogenes ATCC 19404
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia: Preto

Organismo:Desulfotomaculum nigrificans ATCC 19998
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia: Preto

Organismo:Escherichia coli ATCC 25922
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom
Recuperação:40-50%
Cor da Colônia: Sem Preto

Armazenamento e prazo de validade
Armazenar abaixo de 30°C em recipiente bem fechado e meio preparado a 2-8°C. Use antes do prazo de validade no rótulo.

Referências:
1. Tanner F. W., 1944, "The Microbiology of Foods", 2ª Ed., Garrard Press, Illinois, P. 1127.
2. Beerens H., 1958, DSIR, Proc. 2ª Internat. Sym. Food Microbiol., 1957, HMSO, Londres, P. 235.
3.Mossel D. A. A., Golstein Brouwers G. W. M. V. e de Bruin A. S., 1959, J. Path. Bacteriol., 78: 290.
4. Attenborough J. e Scarr M., 1957, J. Appl. Bacteriol., 20: 460.