Agar Lisina Ferro (Lia) Frasco 500g AG-5028 Himedia

AGAR LISINA FERRO (LIA) FRASCO 500G AG-5028 HIMEDIA

Composição**

• Ingredientes Gms / Litro
• Peptona 5.000
• Extrato de levedura 3.000
• Dextrose (Glicose) 1.000
• L-Lisina 10.000
• Citrato férrico de amônio 0,500
• Tiossulfato de sódio 0,040
• Bromocresol roxo 0,020
• Ágar 15.000
• PH final (a 25°C) 6,7 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.

Instruções
Suspenda 34,56 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Distribuir em tubos e esterilizar em autoclave à pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos. Arrefecer os tubos na posição inclinada para formar inclinações com profundidade pontas.

Princípio e Interpretação
O Ágar de Ferro Lisina foi desenvolvido por Edwards e Fife (1) para detectar Salmonellae fermentadora de lactose. As salmonelas são conhecidas por descarboxilar lisina rapidamente e produzir grandes quantidades de sulfureto de hidrogênio (2, 3). Este meio é um meio sensível para a detecção de espécies de Salmonella fermentadoras e não fermentadoras de lactose. Muitas cepas desse grupo fermentam lactose muito rapidamente, suprimindo assim a produção de H2S em Triple Sugar Iron Agar (M021). Portanto, existe a possibilidade de que os organismos frequentemente encontrados em surtos de intoxicação alimentar podem ser ignorados. Thatcher e Clark (4) descreveram o isolamento de espécies de Salmonella de alimentos do ágar-ágar seletivo e inoculá-lo no ágar-lisina e no açúcar triplo (M021) juntos. Utilizando estes dois meios, pode ser feita uma maior discriminação entre organismos coliformes, p. Escherichia e Shigella (5, 6).
Peptona e extrato de levedura fornecem nutrientes essenciais. A dextrose é uma fonte de carboidrato fermentável. Amônio férrico citrato e tiossulfato de sódio são indicadores da formação de H2S. Culturas que produzem sulfeto de hidrogênio causam escurecimento de o meio devido à produção de sulfuretos ferrosos. A descarboxilação da lisina causa uma reação alcalina (cor púrpura) para dar amina cadaverina e os organismos que não descarboxilam lisina produzem butt ácido (cor amarela).
Organismos que desaminam a lisina, formam o ácido alfa - cetocarboxílico, que reage com o sal de ferro próximo à superfície do meio sob a influência do oxigênio para formar um composto marrom avermelhado. O meio é esfaqueado na base da bunda e riscado na inclinação.

Tipo de amostra: Isolado puro

Coleta e manuseio de amostras:
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e Precauções
Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção /vestuário de proteção/proteção ocular/proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão conforme diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio das amostras. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais.

Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado em temperatura recomendada. Consulte o aviso no verso.

Controle de qualidade:
Aparência Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a amarelo acinzentado
Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado: Gel de cor púrpura, transparente a ligeiramente opalescente, forma-se em tubos na forma inclinada
Reação: Reação de solução aquosa a 3,45% p/v a 25°C. pH: 6,7 ± 0,2
pH: 6,50-6,90

Resposta cultural
M377: Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

Resposta cultural

Organismo:Citrobacter freundii ATCC 8090
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio
Inclinação:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo: Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
Inclinação:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
H2S: Reação Negativa

Organismo:Proteus mirabilis ATCC 25933
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo: Reação àcida, com amarelamento do meio
Inclinação:Vermelho escuro, desaminação de lisina
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio

Organismo:Salmonella Arizonae ATCC 13314
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
Inclinação:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
H2S:Reação Positiva com escurecimento do meio

Organismo:Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
Inclinação:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio

Organismo:Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
Inclinação:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio

Organismo:Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Fundo: Reação Ácida, amarelamento do meio
Inclinação:Reação alcalina, roxo ou sem alteração de cor
H2S: Reação Negativa

Armazenamento e prazo de validade
Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em local seco, área ventilada protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Usar antes do prazo de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (7,8).

Referências:
1. Edward P.R. e Fife M.A., 1961, Appl. Microbiol., 9:47
2. Moeller V., 1954, Acta Pathol. Microbiol. Scand., 35: 25
3. Ewing W.H., Davis B.R. e Edward P.R., 1960, Pub. Hlth. Labs., 18: 7
4. Thatcher F.S. e Clark D.S., 1968, University of Toronto Press, p. 10
5. Johnson J. G., Kunz L. J., Barron W. e Ewing W. H., 1966, Appl. Microbiol., 14:21
6. Finegold S.M. e Martin W.J., 1982, Bailey e Scotts Diagnostic Microbiology, 6ª ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.
7.Isenberg, H.D. Procedimentos Clínicos de Microbiologia. 2ª Edição.
8. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1