AGAR KLIGLER FERRO (KIA) FRASCO 500G Ag-5027 Himedia

AGAR KLIGLER FERRO (KIA) FRASCO 500G AG-5027 HIMEDIA

O Ágar Kliger Ferro é recomendado para a identificação diferencial de bacilos entéricos gram-negativos de amostras clínicas e não amostras clínicas com base na fermentação da produção de dextrose, lactose e H2S.

Composição**

• Ingredientes Gms / Litro
• Peptona 15.000
• HM Peptona B # 3.000
• Extrato de levedura 3.000
• Peptona proteica 5.000
• Lactose 10.000
• Dextrose 1.000
• Sulfato ferroso 0,200
• Cloreto de sódio 5.000
• Tiossulfato de sódio 0,300
• Vermelho de fenol 0,024
• Ágar 15.000
• PH final (a 25 ° C) 7,4 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho
# - Equivalente ao extrato de carne bovina

Instruções
Suspender 57,52 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Misture bem e distribua em tubos. Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos. Deixe os tubos esfriarem na posição inclinada para formar declives com pontas de cerca de 1 polegada. As melhores reações são obtidas em meio preparado na hora. Não use tubos ou garrafas com tampa de rosca.

Princípio e Interpretação
O Kligler Iron Agar é uma combinação do meio acetato de chumbo descrito por Kligler (9) e Russels Double Sugar Agar (7) é usado como meio de diferenciação para bacilos tifoides, disenteria e aliados (3). Vermelho de fenol substituído por Bailey e Lacey para o indicador andrade usado anteriormente como indicador de pH (3). O Kligler Iron Agar diferencia os fermentadores de lactose dos não fermentadores.
Diferencia Salmonella Typhi de outras Salmonellae e também Salmonella Paratyphi A de Salmonella Scottmuelleri e Salmonella Enteritidis (4). A fermentação da dextrose resulta na produção de ácido, que ativa o indicador de vermelho para amarelo. Como há pouco açúcar, ou seja, dextrose, a produção de ácido é muito limitada e, portanto, uma reoxidação. O indicador é produzido na superfície do meio e permanece vermelho. No entanto, quando a lactose é fermentada, a grande quantidade de ácido produzido, evita a reoxidação e, portanto, todo o meio fica amarelo. O Ágar de Ferro Kligler, além da peptona, peptona HM B e extrato de levedura, contém lactose e glicose (dextrose), que permite a diferenciação de espécies de bacilos entéricos. O vermelho de fenol é o indicador de pH, que exibe uma mudança de cor na resposta ao ácido produzido durante a fermentação dos açúcares. A combinação de sulfato ferroso e tiossulfato de sódio permite a detecção da produção de sulfeto de hidrogênio, evidenciada por uma cor preta em todo o bumbum ou em uma formação de anéis perto do topo do bumbum. Os não fermentadores de lactose (por exemplo, Salmonella e Shigella) produzem inicialmente uma amarela inclinação devido ao ácido produzido pela fermentação da pequena quantidade de glicose (dextrose). Quando o suprimento de glicose (dextrose) é exausta no ambiente aeróbico da inclinação, a reação reverte para alcalina (inclinação vermelha) devido à oxidação dos ácidos produzido. A reversão não ocorre no ambiente anaeróbico da bunda, que, portanto, permanece ácido (amarelo). Fermentadores de lactose produzem inclinações e pontas amarelas por causa da fermentação de lactose. A alta quantidade de ácidos assim produzido ajuda a manter um pH ácido em condições aeróbicas. Os tubos que mostram a cor original do meio indicam a fermentação de glicose (dextrose) nem lactose. A produção de gás (reação aerogênica) é detectada como bolhas individuais ou pela divisão ou deslocamento do ágar pela formação de rachaduras na extremidade do meio.

Culturas puras de organismos suspeitos de meios de revestimento como MacConkey Agar (M081), Bismuth Sulphite Agar (M027) ou Ágar de citrato de desoxicolato (M065), ágar de SS (M108) etc. são inoculados no ágar de ferro Kligler para identificação.

Tipo de amostra
Isolado puro de amostras clínicas, de alimentos, laticínios e água.

Coleta e manuseio de amostras
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (5,6).
Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (1,10,11).
Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes e padrões locais. (2)
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e Precauções
Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/roupas de proteção/proteção para os olhos/proteção para o rosto. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas nas fichas de dados de segurança individuais.

Controle de qualidade
Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a rosa
Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado: Gel vermelho, límpido a ligeiramente opalescente, forma-se em tubos como inclinações.
Reação: Reação de solução aquosa a 5,75% p/v a 25°C. pH: 7,4 ± 0,2
pH: 7,20-7,60

Resposta cultural
Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 18-48 horas.

Resposta cultural

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Negativa, não escurecimento do meio
Inclinação: Reação Ácida, amarelamento do meio
Fundo: Reação Ácida, amarelamento do meio

Organismo: Klebisiella aerogenes ATCC 13048 (00175*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Negativa, não escurecimento do meio
Inclinação: Reação Ácida, amarelamento do meio
Fundo: Reação Ácida, amarelamento do meio

Organismo: Citrobacter freundii ATCC 8090
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio
Inclinação: Reação Ácida, com amarelamento do meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Proteus vulgaris ATCC 6380
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Negativa
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho do meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Klebisiella pneumoniae ATCC 13883 (00087*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Negativa, sem escurecimento do meio
Inclinação: Reação Ácida, com amarelamento do meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Salmonella Paratyphi A ATCC 9150
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Negativa, sem escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Salmonella Schottmuelleri ATCC 10719
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Salmonella Typhi
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Negativa
H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Positiva, com escvurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Negativa
H2S: Reação Negativa, sem escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida, amarelamento do meio

Organismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Negativa
H2S: Reação Negativa, com escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida com amarelamento do meio

Organismo: Yersinia enterocolítica ATCC 27729
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Variável
H2S: Reação Negativa, sem escurecimento do meio
Inclinação: Reação Alcalina, com vermelho no meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Organismo: Enterobacter cloacae ATCC 13047 (00083*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Gas: Reação Positiva
H2S: Reação Negativa, sem escurecimento do meio
Inclinação: Reação Ácida, com amarelamento do meio
Fundo: Reação Ácida, com amarelamento do meio

Armazenamento e prazo de validade
Armazenar abaixo de 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Em abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar firmemente a garrafa, a fim de evitar a formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em área ventilada seca protegido de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade em rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (5,6).

Referências:
1. American Public Health Association, Métodos Padrão para o Exame de Produtos Lácteos, 1978, 14a Ed., Washington D.C. Clinical Microbiology, 11a Edição. Vol. 1
Os dados foram analisados por meio de entrevistas semiestruturadas e entrevistas semi-estruturadas, com o objetivo de avaliar o desempenho dos participantes.
3.Bailey S.F. e Lacey G.R., 1927, J. Bacteriol., 13: 183.
4.Ewing, 1986, Edwards e Ewings Identification of the enterobacteriaceae, 4a Ed., Elsevier Science Publishing Co., Inc., NOVA IORQUE.
5. Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica. 2ª Edição.
6. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1
7.Kligler I.J., 1917, Am. J. Publ. Health, 7: 1041.
8. Kligler I. J., 1918, J. Exp. Med. 28: 319.
9. Russell F. F., 1911, J. Med. Res. 25: 217.
10. Salfinger Y. e Tortorello M.L. Quinta (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos, 5ª Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
11. Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17 Ed., APHA Inc., Washington, D.C.