Agar Xilose Lisina Desoxicolato Xld Frasco 500g AG-5048 Himedia

AGAR XILOSE LISINA DESOXICOLATO XLD FRASCO 500G AG-5048 HIMEDIA

Composição**

• Ingredientes Gms / Litro
• Extrato de levedura 3.000
• L-Lisina 5.000
• Lactose 7.500
• Sacarose 7.500
• Xylose 3.500
• Cloreto de sódio 5.000
• Desoxicolato de sódio 2.500
• Tiossulfato de sódio 6.800
• Citrato de amônio férrico 0,800
• Vermelho de fenol 0,080
• Ágar 15.000
• PH final (a 25 ° C) 7,4 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.

Instruções
Suspenda 56,68 gramas em 1000 ml de água purificada / destilada. Aqueça com agitação frequente até o meio ferver. NÃO AUTOCLAVE OU SUPERAQUECIMENTO. Transferir imediatamente para um banho de água a 50 ° C. Após o resfriamento, despeje em placas de Petri estéreis. É aconselhável não preparar grandes volumes que exijam aquecimento prolongado, produzindo precipitado. Nota: Pode ocorrer uma leve precipitação no meio, que é propriedade herdada do meio e não afeta o desempenho do meio.

Princípio e Interpretação
O ágar XLD tem sido recomendado para a identificação de Enterobacteriaceae (3) e para testes microbiológicos.
O Ágar XLD foi formulado por Taylor (13-17) para o isolamento e diferenciação de patógenos entéricos, incluindo Salmonella Typhi de outras espécies de Salmonella. De alimentos, água e laticínios (2,12,20,21). O ágar XLD apresenta aumento seletividade e sensibilidade em comparação com outros meios de revestimento, por exemplo Agar SS (M108), Agar EMB (M022) e Bismuto. Ágar de sulfito (M027) (14,16,18 e 4,9,11,19). A formulação do meio não permite o crescimento excessivo de outros organismos sobre Salmonella e Shigella (7). Amostras suspeitas de conter patógenos entéricos, juntamente com outra flora mista, são enriquecidos inicialmente em Base Média RV Semissólida Modificada (M1482) (1).
O meio contém extrato de levedura, que fornece nitrogênio e vitaminas necessárias para o crescimento. Embora os açúcares xilose, lactose e sacarose fornecem fontes de carboidratos fermentáveis, a xilose é incorporada principalmente ao meio, uma vez que é não fermentado por Shigellae, mas praticamente por todos os entéricos. Isso ajuda na diferenciação de espécies de Shigella. O Cloreto de Sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio. A lisina é incluída para diferenciar o grupo Salmonella do não patógenos. As salmonelas fermentam rapidamente a xilose e esgotam o suprimento. Posteriormente, a lisina é descarboxilada pela enzima lisina descarboxilase para formar aminas com reversão para um pH alcalino que imita a reação de Shigella. Para evitar esta reação, coliformes lisina-positivos são adicionados lactose e sacarose para produzir ácido em excesso. Degradação de xilose, lactose e sacarose em ácido fazem com que o indicador vermelho de fenol mude sua cor para amarelo. Bactérias que descarboxilam lisina para cadaverina pode ser reconhecida pelo aparecimento de uma coloração vermelha ao redor das colônias devido a um aumento no pH.
Essas reações podem prosseguir simultaneamente ou sucessivamente, e isso pode fazer com que o indicador de pH exiba vários tons de cor ou pode mudar de amarelo para vermelho em incubação prolongada. Para aumentar a capacidade de diferenciação do Para a formulação, um sistema indicador de H2S, que consiste em tiossulfato de sódio e citrato de amônio férrico, é incluído para a visualização do sulfeto de hidrogênio produzido, resultando na formação de colônias com centros negros. Os produtores de H2S não descarboxilase lisina; portanto, a reação ácida produzida por eles evita o escurecimento das colônias (13).
O Ágar XLD é um meio seletivo e diferencial. Utiliza o desoxicolato de sódio como agente seletivo e, portanto, é inibitório para microorganismos gram-positivos. Algumas cepas de Proteus podem dar coloração vermelha a amarela na maioria das colônias desenvolvendo centros negros, dando origem a reações positivas falsas. Não entéricos como Pseudomonas e Providencia podem exibem colônias vermelhas. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum e S. Gallinarum podem formar colônias vermelhas sem H2S, lembrando assim as espécies de Shigella (10).

Controle de qualidade

• Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a rosa
• Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
• Cor e clareza do meio preparado; Forma de gel transparente a ligeiramente opalescente de cor vermelha em placas de Petri.
• Reação: Reação de solução aquosa a 5,67% p / v a 25 ° C.
• pH: 7,4 ± 0,2

Tipo de amostra: Amostras clínicas - Sangue; Amostras de alimentos e laticínios; amostras de água.

Coleta e manuseio de amostras
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (6,8).
Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (12,20).
Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes e os padrões locais. (15)
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e precauções:
Diagnóstico in vitro Use apenas. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção / vestuário de proteção / olhos proteção / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas nas fichas de dados de segurança individuais.

Limitações:

• 1. Pode ocorrer uma leve precipitação no meio, que é propriedade herdada do meio e não afeta o desempenho do meio.
• 2. Este meio é um meio de uso geral e pode não suportar o crescimento de organismos exigentes.
• 3. Algumas cepas de Proteus podem dar coloração vermelha a amarela, com a maioria das colônias desenvolvendo centros pretos, dando origem a reações positivas falsas.
• 4. Não entéricos como Pseudomonas e Providencia podem exibir colônias vermelhas.
• 5. S. Paratyphi A, S. Coleraesuis, S. Pullorum e S. Gallinarum podem formar colônias vermelhas sem H2S, parecendo assim espécies de Shigella.

Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado em temperatura recomendada.

Controle de qualidade
Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a rosa
Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado: Forma de gel transparente a ligeiramente opalescente de cor vermelha em placas de Petri
Reação: Reação de solução aquosa a 5,67% p / v a 25 ° C. pH: 7,4 ± 0,2
pH: 7,20-7,60

Resposta cultural
A resposta cultural foi observada após uma incubação a 35-37 ° C por tempo especificado. A taxa de recuperação é considerada 100% para crescimento de bactérias no ágar de digestão de caseína de soja.

Resposta cultural

Organismo: Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho com Preto no Centro
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Salmonella Abony NCTC 6017 (00029*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho com Preto no Centro
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Escherichia coli ATCC 8739 (00012*)
Inoculação:50-100
Crescimento: Justo
Valor do Lote Observado:10-30
Recuperação:20-30%
Cor da Colônia:Amarelo
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Justo
Valor do Lote Observado:10-30
Recuperação:20-30%
Cor da Colônia:Amarelo
Período de Incubação:18-72hs

Organismo:Escherichia coli NCTC 9002
Inoculação:50-100
Crescimento:Justo
Valor do Lote Observado:10-30
Recuperação:20-30%
Cor da Colônia:Amarelo
Período de Incubação:18-72hs

Organismo:Proteus vulgaris ATCC 13315
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Roxo com Preto no Centro
Período de Incubação:18-72hs

Organismo:Salmonella Paratyphi A ATCC 9150
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Salmonella Paratyphi B ATCC 8759
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho com Preto no Centro
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho com Preto no Centro
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Salmonella Typhi ATCC 6539
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho com Preto no Centro
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Shigella dysenteriae ATCC 13313
Inoculação:50-100
Crescimento:Bom-Exuberante
Valor do Lote Observado:25-100
Recuperação:>=50%
Cor da Colônia:Vermelho
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Justo-Bom
Valor do Lote Observado:15-40
Recuperação:30-40%
Cor da Colônia:Vermelho
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Shigella sonnei ATCC 25931
Inoculação:50-100
Crescimento:Justo-Bom
Valor do Lote Observado:15-40
Recuperação:30-40%
Cor da Colônia:Vermelho
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: #Klebisiella aerogenes ATCC 13048
Inoculação:50-100
Crescimento:Justo
Valor do Lote Observado:10-30
Recuperação:20-30%
Cor da Colônia:Amarelo
Período de Incubação:18-72hs

Organismo: Enterobacter clocae ATCC 13047 (00083*)
Inoculação:50-100
Crescimento:Justo
Valor do Lote Observado:10-30
Recuperação:20-30%
Cor da Colônia:Amarelo
Período de Incubação:18-72hs

Organismo:Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)
Inoculação:>=10³
Crescimento:Inibido
Valor do Lote Observado: 0
Recuperação:0%
Cor da Colônia: -
Período de Incubação: >=72hs

Organismo: Staphylococcus aureus subsp aureus ATCC 6538 (00032*)
Inoculação: >=10³
Crescimento:Inibido
Valor do Lote Observado: 0
Recuperação:0%
Cor da Colônia: -
Período de Incubação:>=72hs

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)
Inoculação:>=10³
Crescimento:Inibido
Valor do Lote Observado:0
Recuperação:0%
Cor da Colônia: -
Período de Incubação: >=72hs

Armazenamento e prazo de validade
Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Use antes da data de validade em rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, após fechar bem o frasco para evitar grumos formação devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços.
Armazenar em área ventilada e seca, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Fechar o recipiente firmemente depois de usar. Use antes da data de validade no rótulo.
O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (6,8).

Referências:
1. Aspinall S. T., Hindle M. A. e Hutchinson D. N., 1992, Eur. J. Clin. Microbiol. Inf. Dis. 11, 936-939.
2. Baird R.B., Eaton A.D. e Rice E.W., (Eds.), 2015, Métodos Padrão para o Exame de Água e Wastewater, 23a ed., APHA, Washington, D.C.
3. Chadwick P., Delisle G. H e Byer M., 1974, Can. J. Microbiol., 20, 1653-1664.
4. Dunn C. e Martin W. J., 1971, Appl. Microbiol., 22, 17-22.
5. Manual Analítico Bacteriológico da FDA, 2005, 18ª Ed., AOAC, Washington, D.C.
6. Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica. 2ª Edição.
7. Isenberg H. D., Kominos S. e Sigeal M., 1969, Appl Microbiol., 18, 656-659.
8. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1
9. MacCarthy M. D., 1966, N. Z. J. Med. Lab. Technol., 20, 127-131.
10. MacFaddin J. F., 1985, Media para Isolamento-Cultivo-Identificação-Manutenção de Bactérias Médicas, vol. 1, Williams e Wilkins, Baltimore.
11. Rollender M. A., Beckford O., Belsky R. D e Kostroff B. 1969, Am. J. Clin. Pathol., 51, 284-286.
12. Salfinger Y. e Tortorello M.L. Quinta (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos, 5ª Ed., American Public Health Association, Washington, D.C
13. Taylor W. L., 1965, Am. J. Clin. Pathol., 44: 471-475.
14. Taylor W. L. e Harris B., 1965, Am. J. Clin. Pathol., 44: 476.
15. Taylor W. L. e Harris B., 1967, Am. J. Clin. Pathol., 48: 350.
16. Taylor W. L. e Schelhart B., 1967, Am. J. Clin. Pathol., 48: 356.
17. Taylor W. L. e Schelhart B., 1968, Am. J. Clin. Pathol., 16: 1387.
18. Taylor W. L. e Schelhart B., 1969, Appl. Microbiol., 18.393-395.
19. Taylor W. L. e Schelhart B., 1969, Appl. Micro. 18, 1387-1392.
20. Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17ª Ed., APHA Inc., Washington, D.C.
21. Williams H., (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis da Association of Official Analytical Chemists, 19a Ed., AOAC, Washington DC.