Caldo Lauril Sulfato Triptose Frasco 500g AG-6010 Himedia

CALDO LAURIL SULFATO TRIPTOSE FRASCO 500G AG-6010 HIMEDIA

Composição**

• Ingredientes Gms / Litro
• Triptose 20.000
• Lactose 5.000
• Cloreto de sódio 5.000
• Hidrogenofosfato dipotássico 2.750
• Di-hidrogenofosfato de potássio 2.750
• Lauril sulfato de sódio (SLS) 0,100
• PH final (a 25 ° C) 6,8 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.

Instruções
Suspenda 35,6 gramas em 1000 ml de água purificada / destilada. Aqueça se necessário para dissolver completamente o meio. Distribuir em tubos contendo tubos Durhams invertidos. Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121 ° C) por 15 minutos. Para inóculo de 1 ml ou menos, use meio de força única. Para inóculos de 10 ml ou mais, força dupla ou meio proporcional deve ser preparado.

Princípio e Interpretação
Os coliformes são considerados membros de Enterobacteriaceae, que crescem na presença de sais biliares e produzem ácido e gás da lactose dentro de 48 horas a 37 ° C (4). Essas bactérias também podem ser definidas como membros de Enterobacteriaceae capaz de crescer a 37 ° C, que normalmente possui b-galactosidase (2). O Caldo de Lauril Sulfato é utilizado para a detecção de coliformes na água, laticínios e outros alimentos, conforme recomendado pela APHA (1,9,10). Também pode ser usado para detecção presuntiva de coliformes na água, efluente ou esgoto pelo teste MPN (3). O Caldo de Lauril Sulfato foi desenvolvido por Mallmann e Darby (8). Cowls (3) demonstrou que a inclusão de lauril sulfato de sódio torna o meio seletivo para bactérias coliformes. Mais tarde foi investigado que o Caldo Lauril Sulfato apresentava um índice de cólon mais alto que os confirmatórios métodos padrão e também que a produção de gás no Lauril Sulfato de Caldo não apenas atua como teste presuntivo, mas também como um teste confirmatório para a presença de coliformes, no teste de rotina da água (8). O Caldo Lauril Sulfato também é recomendado pelo Comitê ISO para a detecção de coliformes (5).
O Caldo de Lauril Sulfato é projetado para obter um crescimento rico e uma quantidade substancial de gás de pequenos inóculos de organismos coliformes.
Os portadores de esporos aeróbicos são completamente inibidos neste meio. A triptose fornece substâncias essenciais para o crescimento, como o nitrogênio e compostos de carbono, sulfato e oligoelementos. Os fosfatos de potássio fornecem um sistema tampão, enquanto o sódio cloreto mantém o equilíbrio osmótico. O lauril sulfato de sódio inibe outros organismos que não os coliformes. Para inóculo de 1 ml ou menos, use meio de força única. Para inóculos de 10 ml ou mais, deve-se preparar dupla força ou meio proporcional.
Após a inoculação, incubar os tubos a 37 ° C por 24 a 48 horas. Para cada tubo que mostra fermentação (fermentação primária), inocular dois tubos de Lauryl Tryptose Broth do tubo que mostra a fermentação primária e incubar esses tubos a 37 ° C e 44 ° C, respectivamente. Se houver fermentação no tubo incubado a 44 ° C após 8 a 24 horas, execute o teste de indol adicionando Reagente de Kovacs. Um teste de indole positivo em um tubo de caldo mostrando a produção de gás a 44 ° C indica a presença de Escherichia coli. Se não ocorrer fermentação no tubo incubado a 37°C após 24 horas, presume-se que a fermentação primária seja devida a organismos que não sejam coliformes. O caldo fica turvo se armazenado de 2 a 8°C, mas é limpo à temperatura ambiente, referências apropriadas para procedimentos padrão (3, 4, 5).

Tipo de amostra
Amostras de alimentos e laticínios; Amostras de água, amostras clínicas - fezes

Coleta e manuseio de amostras:

• Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, conforme diretrizes estabelecidas (6,7).
• Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (9,10).
• Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, conforme diretrizes e padrões locais (1,4).
• Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e Precauções
Diagnóstico in vitro. Use apenas. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção / vestuário de proteção / olhos proteção / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas nas fichas de dados de segurança individuais.

Limitações:
1. Devido às más variações nutricionais, algumas cepas podem apresentar crescimento deficiente.

Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção da etiqueta dentro do prazo de validade, quando armazenado na temperatura recomendada.

Controle de qualidade
Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre
Cor e clareza do meio preparado: Solução clara, de cor amarela clara, sem precipitado
Reação: Reação de solução aquosa a 3,56% p / v a 25 ° C.
pH: 6,8 ± 0,2

Resposta Cultural
M080: Características culturais observadas após uma incubação a 35-37 ° C por 18-24 horas.

Resposta Cultural

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Produção de Gas: Reação Positiva
Produção de Indol (44°C): Reação Positiva, anel vermelho na interface do meio

Organismo: Klebisiella aerogenes ATCC 13048 (00175*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Produção de Gas: Reação Positiva
Produção de Indol (44°C): Reação Negativa, sem desenvolvimento de cor/anel nublado

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)
Inoculação: >=10³
Crescimento: Inibido
Produção de Gas: -
Produção de Indol (44°C): -

Organismo: Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*)
Inoculação: 50-100
Crescimento: Exuberante
Produção de Gas: Reação Positiva
Produção de Indol (44°C): Reação Negativa, sem desenvolvimento de cor/anel nublado

Organismo: Staphylococcus aureus subsp aureus ATCC 25923(00034*)
Inoculação: >=10³
Crescimento: Inibido
Produção de Gas: -
Produção de Indol (44°C): -

Armazenamento e prazo de validade
Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 15-25°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em local seco área ventilada protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Usar antes do prazo de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra devem ser descontaminado e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (6,7).

Referências:
1. Baird R.B., Eaton A.D. e Rice E.W., (Eds.), 2015, Métodos Padrão para o Exame de Água e Wastewater, 23a ed., APHA, Washington, D.C.
2. Collee J. G., Fraser A. G., Marmion B. P., Simmons A., (Eds.), Mackie e McCartney, Practical Medical Microbiology, 1996, 14ª Edição, Churchill, Livingstone
3. Cowls P. B., 1938, J. Am. Water Works Assoc., 30: 979.
4. Departamento de Meio Ambiente, Departamento de Saúde e Seguridade Social, Serviço de Laboratório de Saúde Pública, 1982, Métodos para o Exame de Água e Materiais Associados, O Exame Bacteriológico de Fontes de Água Potável, 1982, Escritório Majestys Stationary, Londres.
5. Organização Internacional de Normalização (ISO), 1991, Projeto de ISO / DIS 4831. APHA Inc., Washington, D.C.
6.Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica. 2ª Edição. Os dados foram analisados por meio de questionários, entrevistas, entrevistas e entrevistas com os participantes.
7. 7.Jorgensen,J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1
8. Mallmann W. C. e Darby C. W., 1941, Am. J. Saúde Pública, 31: 127
9. Salfinger Y. e Tortorello M.L. Quinta (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Foods, 5th Ed., Associação Americana de Saúde Pública, Washington, D.C.
10. Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17ª Ed.,