Agar Sangue Base Bs Frasco 500G AG-5041 Himedia

AGAR SANGUE BASE BS FRASCO 500G AG-5041 HIMEDIA

AG-5041 - O Ágar Base Sangue é recomendado como uma base à qual o sangue pode ser adicionado para uso no isolamento e cultivo de microorganismos patogênicos exigentes como Neisseria, Streptococcus, etc.

Composição

• Ingredientes Gms / Litro
• HM peptona B # 10.000
• Triptose 10.000
• Cloreto de sódio 5.000
• Ágar 15.000
• PH final (a 25°C) 7,3 ± 0,2
• Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho
• Equivalente à peptona do coração bovino

Instruções

• Suspenda 40,0 gramas em 1000 ml de água purificada / destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Esterilizar por autoclavagem a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. Arrefecer a 45-50°C e adicionar assepticamente sangue desfibrinado estéril a 5% v/v. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Princípio e Interpretação

• O Ágar Base Sangue é um meio altamente nutritivo geralmente usado como meio basal para a preparação de ágar-sangue por suplementação com sangue. Também pode ser usado como meio de uso geral sem a adição de sangue.
• Os meios de base de ágar-sangue podem ser utilizados com adição de fosfato de fenolftaleína (7) para a detecção de produção de fosfato Estafilococos, com adição de sal e ágar para avaliação da contaminação da superfície de equipamentos e carcaça de suíno (2) e determinar a faixa de salinidade das Flavobactérias marinhas (3). Também pode ser usado para a preparação de antígenos de Salmonella Typhi (9).
• A base de ágar-sangue é recomendada pela APHA (8) e métodos padrão (11, 1) para o teste de amostras de alimentos. A peptona B e a triptose HM fornecem carbono, nitrogênio, aminoácidos e vitaminas. O cloreto de sódio ajuda a manter a equilíbrio osmótico do meio. A adição de sangue torna o meio mais nutritivo, proporcionando crescimento adicional fatores exigidos pelos organismos exigentes. Também ajuda na visualização das reações hemolíticas. No entanto, reações hemolíticas dependem do sangue animal usado. O sangue de ovelha fornece melhores resultados para os estreptococos do grupo A (10). Mas o sangue de ovelha não consegue apoiar o crescimento de Haemophilus haemolyticus, uma vez que o sangue de ovelha é deficiente em nucleotídeos de piridina. No entanto, quando cavalo o sangue é usado colônias de H. haemolyticus produzem hemólise e imitam Streptococcus pyogenes (6).

Tipo de amostra

• Material clínico: sangue e outro material patológico; amostras de alimentos.

Coleta e manuseio de amostras

• Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (4,5).
• Para amostras de alimentos, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (8).
• Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e Precauções

• Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção/de proteção vestuário/proteção ocular/proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura.
• As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. Orientações de segurança podem ser consultados em fichas de dados de segurança individuais.

Limitações

• 1. Recomenda-se a adição de sangue de ovelha para detectar hemólise. Este meio não suporta o crescimento de H.haemolyticus.
• 2. A adição de sangue de cavalo ou de coelho ao meio base suporta o crescimento de H.haemolyticus, mas se assemelha a beta-hemolítica Estreptococos e, portanto, devem ser confirmados.
• 3. O padrão hemolítico varia de acordo com a fonte de sangue utilizada.

Desempenho e Avaliação

• O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado à temperatura recomendada.

Controle de qualidade

• Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre
• Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
• Cor e clareza do meio preparado: Meio basal: gel de cor âmbar clara, clara a ligeiramente opalescente. Após adição de 5% v / v de sangue desfibrinado estéril: Formas de gel opaco de cor vermelho cereja em placas de Petri.
• Reação: Reação de solução aquosa a 4,0% p/v a 25°C. pH: 7,3 ± 0,2
• pH: 7,10-7,50

Resposta cultural

• Características culturais observadas com adição de sangue desfibrinado estéril a 5% p/v, após uma incubação a 35-37°C por 18-48 horas.

Organismo

• Neisseria meningitidis ATCC 13090
• Inoculação:50-100
• Crescimento sem Sangue:Justo
• Recuperação sem Sangue: 40-50%
• Crescimento com Sangue:Exuberante
• Recuperação com Sangue:>=70%
• Hemólise: Nenhum

Organismo

• Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)
• Inoculação:50-100
• Crescimento sem Sangue:Bom
• Recuperação sem Sangue:50-70%
• Crescimento com Sangue:Exuberante
• Recuperação com Sangue:>=70%
• Hemólise: Beta
   

Organismo

• Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (00036*)
• Inoculação:50-100
• Crescimento sem Sangue:Bom
• Recuperação sem Sangue:50-70%
• Crescimento com Sangue:Exuberante
• Recuperação com Sangue:>=70%
• Hemólise: Nenhum

Organismo

• Streptococcus pneumoniae ATCC 6303
• Inoculação:50-100
• Crescimento sem Sangue:Justo-Bom
• Recuperação sem Sangue:40-50%
• Crescimento com Sangue:Exuberante
• Recuperação com Sangue:>=70%
• Hemólise: Alpha

Organismo

• Streptococcus pyogenes ATCC 19615
• Inoculação:50-100
• Crescimento sem Sangue:Justo-Bom
• Recuperação sem Sangue:40-50%
• Crescimento com Sangue:Exuberante
• Recuperação com Sangue:>=70%
• Hemólise: Beta

Armazenamento e prazo de validade

• Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo.
• Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, após fechar bem o frasco, a fim de evitar a formação de grumos devido a natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em local ventilado a seco área protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Selar o recipiente firmemente após o uso.
• Use antes da data de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte

• O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (4,5).

Referências

• 1. Atlas R.M., 1993, Handbook of Microbiology of Microbiological Media, CRC Press, Boca Raton, Fla.
• 2. Hansen N. H., 1962, J. Appl. Bacteriol., 25:46.
• 3. Hayes P.R., 1963, J. Gen. Microbiol., 30: 1.
• 4. Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica. 2ª Edição.
• 5. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015)
• Manual Clinical Microbiology, 11ª Edição. Vol. 1
• 6. Murray P. R., Barão J. H., Jorgensen J. H., Pfaller M. A., Yolken R. H., (Eds.), 8ª Ed., 2003, Manual of Clinical Microbiology, ASM, Washington, DC.
• 7. Noble W. C., 1962, J. Clin, Pathol., 15: 552.
• 8. Salfinger Y. e Tortorello M.L. Quinta (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de
• Foods, 5th Ed., Associação Americana de Saúde Pública, Washington, D.C.
• 9. Schuber J.H., Edwards P.R. e Ramsere C.H., 1959, J. Bacteriol., 77: 648.
• 10. Snavely J. G. e Brahier J., 1960, Am. J. Clin. Pathol., 33: 511.
• 11. U.S. Food and Drug Administration, 1995, Bacteriological Analytical Manual, 8ª Ed., AOAC International, Gaithersburg, Md.