Agar Cystine H Agar Base 500g AG-5050 Himedia

AGAR CYSTINE H AGAR BASE 500G AG-5050 HIMEDIA

AG-5050 - O Ágar Cistina H, quando enriquecido com hemoglobina, é recomendado para o cultivo de Francisella tularensis. Sem enriquecimento, ele suporta um excelente crescimento de cocos Gram-negativos e outros organismos patogênicos.

Composição**

• Ingredientes Gms / Litro
• Sólidos de infusão de HM B # 10.000
• Peptona de proteose 10.000
• Dextrose 10.000
• Cloreto de Sódio 5.000
• L-Cistina 1.000
• Agar 15.000
• PH final (a 25 ° C) 6.8 ± 0.2

** Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho
# - Equivalente à infusão Beefeheart (sólidos)

Instruções
Suspenda 51 gramas em 1000 ml de água purificada / destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121 ° C) por 15 minutos. Quando for enriquecido com hemoglobina (2%), suspender 10,2 gramas do meio em 100 ml de água destilada. Esterilize como acima. Resfrie o meio a 50 ° C e adicione assepticamente 100 ml de solução de hemoglobina estéril a 2%. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Princípio e Interpretação
Francisella tularensis é a causa da tularaemia, uma doença semelhante a uma praga de roedores e outros pequenos organismos. Foi descrita pela primeira vez nos seres humanos em 1907 (4). Os organismos são aeróbios estritos; os isolados frescos não podem ser cultivados em meio comum, mas requerem um meio complexo contendo sangue, ou extratos de tecido e cistina. Várias formulações de meios foram utilizadas para isolar este microrganismo. O Agar de Cistina Dextrose Sanguínea, descrito por Francis (1) foi considerado satisfatório para o cultivo de F.tularensis. A adição de 0,05% de cistina e 1% de dextrose ao Agar de Infusão Cardíaca também pode ser empregada para o cultivo de F.tularensis (6). Subsequentemente adicionou-se hemoglobina à Base de Ágar Cardíaco Cystine para desenvolver um meio de cultivo satisfatório de F.tularensis (5). Este meio é também conhecido como Agar de Glucose Sanguínea Cistina e é o meio mais adequado para o isolamento de F.tularensis (1). A hemoglobina fornece nutrientes adicionais e fatores de crescimento. Este meio também suporta o crescimento de cocos gram-negativos e outros microrganismos patogénicos sem enriquecimento adicional. Cystine Heart Agar Base pode ser suplementada com sangue de coelho e agentes antimicrobianos (2).
Este meio é um meio nutricionalmente rico, que também pode ser utilizado para o cultivo de muitos outros organismos geralmente difíceis de cultivar.
Os sólidos de infusão de HM B e peptona proteica são fontes de carbono, azoto, vitaminas e minerais. A dextrose é uma fonte de energia. L A cistina é a fonte de aminoácidos. O cloreto de sódio fornece os íons essenciais. O crescimento excessivo de organismos contaminantes pode ser reduzido pela incorporação de 100-500 unidades de penicilina por ml no meio (4).
F.tularensis é um agente patogénico de Nível 2 de Biossegurança que pode ser transmitido por aerossóis ou pela penetração de pele intacta (2).
O uso de batas, luvas e máscaras é recomendado para pessoas que manuseiem material suspeito de infecção (7).

Tipo de espécime
Amostras clínicas - sangue

Coleta e manuseio de amostras:
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio de amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (2,3). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e precauções
Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção ocular / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais.

Limitações:
1. Devem ser realizados mais testes bioquímicos e sorológicos para posterior identificação.
Desempenho e Avaliação
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções do rótulo dentro do prazo de validade, quando armazenado na temperatura recomendada.
Controle de qualidade
Aparência:
Pó de fluxo livre homogêneo de creme a amarelo
Gelificante:
Firme, comparável com gel de ágar 1,5%

Cor e clareza do meio preparado
Meio basal: Gel transparente a ligeiramente opalescente de cor âmbar após adição de solução de hemoglobina a 2%: Gel opaco de cor marrom chocolate em placas de Petri

Reação
Reação de solução aquosa 5,1% p / v a 25 ° C. pH: 6,8 ± 0,2

pH
6,60-7,00

Resposta Cultural
Características culturais observadas com a adição de 2% de hemoglobina após uma incubação a 35-37 ° C por 40-48 horas.

Organismo Crescimento

Francisella tularensis ATCC 29684 Luxuriante
Neisseria meningitidis ATCC 13090 Luxuriante
Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 Luxuriante
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Luxuriante

Armazenamento e vida útil
Armazenar entre 10-30 ° C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30 ° C. Use antes da data de validade na etiqueta. Na abertura, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços.
Armazene em área ventilada e seca protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição. Sele o recipiente bem após o uso. Use antes da data de validade na etiqueta.
O desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade declarado.

Disposição
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e / ou incineração das preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir os procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos e o material que entra em contato com a amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (2,3).

Referência
1. Francis, 1928, JAMA, 91:1155.
2. Isenberg, (Ed.), 1992, Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
4. Murray P. R., Baron J. H., Pfaller M. A., Jorgensen J. H. and Tenover F. C., Yolken R. H., (Ed.), 1999, Manual of Clinical Microbiology, 7th Ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5. Rhamy, 1933, Am. J. Clin. Pathol., 3:121.
6. Shaw, 1930, Zentr. Bakt. I. Abt. Orig., 118:216.
7. U.S. Public Health Service, Centers for Disease Control and Prevention, and National Institutes of Health, 1999, Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 4th Ed., HHS Publication.