Agar Cromogenico Bacillus Frasco 500g AG-5065 Himedia

AGAR CROMOGENICO BACILLUS FRASCO 500G AG-5065 HIMEDIA

AG-5065 - ÁGAR CROMOGÊNICO BACILLUS (M1651)

USO PRETENDIDO
É recomendado para isolamento e diferenciação entre várias espécies de Bacillus de uma cultura mista em alimentos, amostras clínicas e não clínicas pelo método cromogênico.

COMPOSIÇÃO

• Ingredientes (g/L)
• Peptona: 10,000
• HM Extrato#: 1,000
• D-Manitol: 10,000
• Cloreto de sódio: 10,000
• Mistura cromogênica: 3,200
• Vermelho de fenol: 0,025
• Ágar: 15,000
• pH Final (a 25°C): 7.1 ±0.2

**Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho
# Equivalente a extrato de carne

INSTRUÇÕES
Suspender 49,22g em 1000mL de água destilada. Aqueça até a ebulição para dissolver o meio completamente. Esterilizar em autoclave a 15 lbs de pressão (121ºC) por 15 minutos. Resfrie a 50°C e adicione assepticamente o conteúdo reidratado de 1 frasco de Suplemento seletivo Polimixina B (FD003) se desejado. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

PRINCIPIO E INTERPRETAÇÃO
A maioria das espécies de Bacillus aparentemente tem pouco ou nenhum potencial patogênico e raramente está associada a doenças em humanos ou animais inferiores. A principal exceção a isso são Bacillus anthracis, o agente do antraz, e Bacillus cereus, mas várias outras espécies, particularmente aquelas do grupo B.subtilis, foram implicadas em intoxicação alimentar e outras infecções humanas e animais (1).
Bacillus cereus causa intoxicação alimentar devido ao consumo de arroz contaminado (3, 4, 5), outros alimentos ricos em amido, como batata, macarrão e queijo, também foram implicados, infecções oculares e uma ampla gama de outras condições clínicas, como formação de abscesso, meningite, septicemia e infecção de feridas.
Ágar Cromogênico Bacillus é baseado na formulação de Ágar MYP formulado por Mossel et. al.,(2) usado para enumeração de Bacillus cereus e Bacillus
thuringiensis quando presentes em grande número em certos alimentos.
O meio contém peptona e extrato HM, que fornecem compostos nitrogenados. O manitol serve como carboidrato fermentável, cuja fermentação pode ser
detectada pelo vermelho de fenol. Organismos fermentadores de manitol, como B. megaterium, produzem colônias de cor amarela. A mistura cromogênica
presente no meio é clivada pela enzima beta-glucosidase encontrada em B. cereus resultando na formação de colônias azuis. B.thuringiensis também cresce
como colônias azuis/verdes neste meio, pois B.cereus e B.thuringiensis são bioquimicamente idênticos, porém B.cereus mostra colônias planas com centros
azuis distintos, enquanto B.thuringiensis mostra margens irregulares. Se for necessário o isolamento seletivo de B.cereus ou B.thuringiensis , adicione
assepticamente polimixina B (FD003).

TIPO DE AMOSTRA
Amostras clínicas: Sangue;
Amostras de alimentos e laticínios

COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para manusear amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (6,7).
Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes (8,9,10).
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

AVISOS E PRECAUÇÕES
Uso para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/ vestuário de proteção/ proteção ocular/ proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais

LIMITAÇÕES
1.Algumas cepas podem apresentar baixo crescimento devido a variações nutricionais.
2. Pode ser observada uma pequena variação na cor.

DESEMPENHO E AVALIAÇÃO
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro da temperatura recomendada.

CONTROLE DE QUALIDADE
Apariência:
Pó homogeneo de fluxo livre de creme a amarelo

Gelificação:
Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%

Cor e clareza do meio preparado:
Cor vermelha, claro a ligeiramente opalescente em placas de Petri

Reação:
Reação de 4,9% p/v em solução aquosa a 25°C, pH: 7,1±0,2

pH
6,90-7,30

Resposta cultural:
Características culturais observadas após incubação a 30°C por 24-48 horas.

ORGANISMO: Bacillus subtilis ATCC 6633 (00003*)
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Razoável
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: 20-30%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Inibido
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: 0%
COR DA COLÔNIA: Colônias verdes amareladas a verdes

ORGANISMO: Bacillus cereus ATCC 10876
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
COR DA COLÔNIA: colônias azuis claras, grandes e planas com centro azul

ORGANISMO: Bacillus thuringiensis ATCC 10792
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
COR DA COLÔNIA: Colônias azuis claras, grandes e planas com margens irregulares

ORGANISMO: Bacillus megaterium ATCC 14581
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Inibido
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: 0%
COR DA COLÔNIA: Colônias mucóides amarelas

ORGANISMO: Bacillus coagulans ATCC 7050 (00002*)
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Inibido
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: 0%
COR DA COLÔNIA: Colônias rosadas, pequenas e elevadas

ORGANISMO: Bacillus pumilis ATCC 14884
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Bem abundante
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: Pobre
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: 10-20%
COR DA COLÔNIA: Colônias de verde claro a verde

ORGANISMO: Staphylococcus aureus ATCC 25923 (00034*)
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Abundante
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Inibido
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: 0%
COR DA COLÔNIA: Colônias amarelas

ORGANISMO: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)
INOCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO SEM ADIÇÃO DE FD003: Abuendante
RECUPERAÇÃO SEM ADIÇÃO DE FD003: >=50%
CRESCIMENTO COM ADIÇÃO DE FD003: Inibido
RECUPERAÇÃO COM ADIÇÃO DE FD003: 0%
COR DA COLÔNIA: Colônias de verde claro a verde

* Números WDCM correspondentes

ARMAZENAMENTO E PRAZO DE VALIDADE
Armazene o meio desidratado em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2°C - 8°C. Use antes da data de validade no rótulo.
Ao abrir, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazene em área seca e ventilada, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche bem o recipiente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo.
O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade.

DESCARTE
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e materiais que entrem em contato com amostras clínicas devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (6,7).

REFERÊNCIAS
1.Murray P. R., Baron J. H., Pfaller M. A., Jorgensen J. H. and Yolken R. H., (Eds.), 2003, Manual of Clinical Microbiology,
8th Ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
2.Mossel D. A. A., Koopman M. J. and Jongerium E., 1967, Appl. Microbiol., 15:650.
3.Mortimer P. R. and McCann G., 1974, Lancet, 1043.
4.Bouza E., Grant S., Jordan C. et al, 1979, Arch. Ophthamol., 97:488.
5.Wohlgemuth K., Kirkbride C. A., Bicknell E. J. and Ellis R. P., 1972 Am. Vet. Met, Ass. 161:1691.
6.Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 2nd Edition.
7. Jorgensen,J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015)
Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
8. American Public Health Association, Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 1978, 14th Ed., Washington
D.C.
9. Salfinger Y., and Tortorello M.L. Fifth (Ed.), 2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of
Foods, 5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
10. Wehr H. M. and Frank J. H., 2004, Standard Methods for the Microbiological Examination of Dairy Products, 17th Ed.,
APHA Inc., Washington, D.C.