Agar Cled Com Azul De Bromotimol Frasco 500G AG-5015 Himedia

AGAR CLED COM AZUL DE BROMOTIMOL FRASCO 500G AG-5015  HIMEDIA

AG-5015 - O Ágar C.L.E.D. com azul de bromotimol é recomendado para isolamento, enumeração e identificação de patógenos urinários com base na fermentação da lactose.

Composição

•  Ingredientes Gms / Litro
• Peptona 4.000
• Tryptone 4.000
• HM Peptona B # 3.000
• Lactose 10.000
• L-cistina 0,128
• Azul de bromotimol 0,020
• Ágar 15.000
• PH final (a 25 ° C) 7,3 ± 0,2
• Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.
• Equivalente ao extrato de carne bovina

Instruções

• Suspenda 36,15 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos. Arrefecer até 45-50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Princípio e Interpretação

• Em meio sólido, Sandys relatou que o enxame de espécies de Proteus pode ser controlado restringindo os eletrólitos. Anteriormente, o enxame de Proteus era controlado pela adição de álcool, agente tensoativo, azida de sódio, ácido bórico etc. ao meio. Posteriormente, o meio Sandys foi modificado por Mackey e Sandys, substituindo o manitol por lactose e sacarose e elevando a concentração de ágar e azul de bromo-timol. Esta formulação foi posteriormente modificada pelos mesmos autores, denominados C.L.E.D. (Deficiente em eletrólitos de cistina-lactose) excluindo a sacarose e incluindo a L-cistina para promover o crescimento de coliformes anões dependentes de cistina. Este meio é recomendado para uso em bacteriologia urinária, promovendo o crescimento de todos os patógenos urinários. C.L.E.D. O meio também é recomendado para procedimentos com vareta de imersão e como meio de transporte de inoculo por imersão para amostras de urina.
• Peptona, triptona e HM A peptona B fornece compostos nitrogênicos e carbonáceos, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes essenciais para o crescimento. A lactose é o açúcar fermentável. A cistina apoia o crescimento da colônia anã coliforme. O azul de bromo-timol é o indicador de pH que fica amarelo em pH ácido.
• A bacteriúria pode ser quantificada inoculando a superfície de um meio de agar por diluição adequada. Inocule o meio imediatamente após a coleta de urina. Também pode ser inoculado por métodos de loop calibrado ou duplicação por placa de diluição.

Tipo de amostra

• Amostras clínicas - urina

Coleta e manuseio de amostras

• Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas. Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e precauções

• Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção /vestuário de proteção/proteção ocular/proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser consultadas nas fichas de dados de segurança individuais.

Limitações

• 1.Iniciação à antibioticoterapia, antes da coleta da amostra, baixo pH da urina (menos de 5), etc., pode resultar em baixa contagem bacteriana de pacientes infectados.
• 2. As espécies de Shigella podem não crescer neste meio.

Desempenho e Avaliação

• O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção da etiqueta dentro do prazo de validade, quando armazenado na temperatura recomendada.

Controle de qualidade

• Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre
• Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
• Cor e clareza do meio preparado
• Forma de gel de cor verde clara a ligeiramente opalescente em placas de Petri.
• Reação: Reação de solução aquosa a 3,61% p/v a 25°C. pH:7,3 ± 0,2
• pH: 7,10-7,50

Resposta cultural

• Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

Organismo

• Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• Recuperação: >=70%
• Cor da Colônia: ligeiramente amarelado ou esverdeado

Organismo

• Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• Recuperação: >=70%
• Cor da Colônia: amarelo opaco, ligeiramente amarelo mais profundo no centro

Organismo

• Klebisiella pneumoniae ATCC 13883 (00097*)
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• Recuperação: >=70%
• Cor da Colônia: amarelo a azul esbranquiçado

Organismo

• Proteus vulgaris ATCC 13315
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• Recuperação: >=70%
• Cor da Colônia: Azul

Organismo

• Salmonella Typhi ATCC 6539
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• Recuperação: >=70%
• Cor da Colônia: Azul

Organismo

• Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• Recuperação: >=70%
• Cor da Colônia: Amarelo profundo

Chave

• Números correspondentes do WDCM.

Armazenamento e prazo de validade

• Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, após fechar firmemente o frasco para evitar a formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços.
• Armazenar em área ventilada seca e protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Fechar o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo.
• O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte

• O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e o material que entrar em contato com a amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais.

Referências

• 1. Sandys, 1960, J. Med. Lab. Technol., 17: 224.
• 2. Mackey e Sandys, 1965, Ir. Med. J. 2: 1286.
• 3. MacKey e Sandys, 1966, Ir. Med. J. 1: 1173.
• 4. Dixson J. M. S. e Clark M. A., 1968, Conc. Med. Assoc. J., 99 (15)
• 5. Benner E. J., 1970, Appl. Microbiol., 19 (3), 409
• 6. MacFaddin J. F., 1985, Media para Isolamento-Cultivo-Identificação-Manutenção de Bactérias Médicas, vol. I, Williams e Wilkins, Baltimore Revisão: 02/2018
• 7.Isenberg, H.D. Manual de Procedimentos de Microbiologia Clínica. 2ª Edição.
• 8. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1