Caldo Ec Escherichia Coli Frasco 500G AG-6007 Himedia

CALDO EC ESCHERICHIA COLI FRASCO 500G AG-6007 HIMEDIA

AG-6007 - O Caldo EC é recomendado para a enumeração seletiva de Escherichia coli presumida pela técnica MPN a partir de amostras de água e de amostras clínicas.

Composição

• Ingredientes Gms / Litro
• Triptona 20.000
• Lactose 5.000
• Mistura de sais biliares 1.500
• Fosfato dipotássico 4.000
• Fosfato monopotássico 1.500
• Cloreto de sódio 5.000
• PH final (a 25 ° C) 6,9 ± 0,2
• Fórmula ajustada, padronizada para atender às configurações de desempenho.

Instruções

• Suspender 37 gramas em 1000 ml de água destilada. Isso é necessário para dissolver completamente o meio. Dispensar em tubos de ensaio contendo tubo Durhams invertido. Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos. Ajustar a concentração do meio de acordo com o tamanho da amostra.

Princípio e Interpretação

• O Caldo EC é usado para detecção de coliformes durante o exame bacteriológico de água, leite e alimentos. Foi originalmente descrito por Hajna e Perry (3). Este meio foi utilizado posteriormente por Fishbein e Surkiewicz para realizar testes confirmatórios de Escherichia coli (2). Também é usado nos métodos MPN (1) e é frequentemente usado para confirmação de coliformes. O procedimento empregado no EC Medium fornece informações sobre a fonte do grupo coliforme (fecal ou não fecal) quando usado como teste confirmatório (6). O caldo CE não deve ser utilizado para o isolamento direto de coliformes, pois o enriquecimento prévio. É necessário um meio presuntivo para a recuperação ideal dos coliformes fecais. O triptone fornece compostos nitrogenados e carbonáceos, aminoácidos de cadeia longa e outros nutrientes essenciais para o crescimento. A lactose é o açúcar fermentável. Uma mistura de sais biliares inibe bactérias gram-positivas, especialmente bacilos e fezes Estreptococos. Os fosfatos controlam o pH durante a fermentação da lactose. A produção de gás em um tubo de fermentação dentro de 24 horas ou menos é uma evidência presuntiva da presença de bactérias coliformes. Este meio pode ser usado a 37°C para a detecção de organismos coliformes ou a 44,5°C para o isolamento de Escherichia coli da água e dos mariscos) ou a 45,5°C para alimentos.
• Ao utilizar amostras com mais de 10 ml, o meio deve ser reconstituído a uma concentração equivalente à especificada nas instruções, uma vez que a amostra é adicionada, o procedimento de trabalho é o seguinte: Transfira um ciclo de cultura de todos os tubos de Caldo de Lauril Sulfato (M080) mostrando a formação de gás dentro de 24 horas e de todos os tubos que mostram crescimento bacteriano dentro de 48 horas para os tubos de caldo EC. Dentro de 30 minutos do inóculo, coloque os tubos em banho-maria e incube a 44°C por 24 horas. Considere o crescimento mostrando a produção de gás como positiva.
• Calcule a densidade dos organismos coliformes fecais usando tabelas de MPN. Reações falsas-negativas na recuperação de coliformes podem ocorrer devido ao baixo pH, refrigeração e uso de agentes bactericidas ou bacteriostáticos (8).
• Formação de gás a 44,5°C ou 45,5°C (e 37°C) Escherichia coli, possivelmente também outros coliformes. Formação de gases a 37°C Bactérias coliformes sem Escherichia coli.

Tipo de amostra

• Clínicas - fezes; Amostras de alimentos; Amostra de água.

Coleta e amostras de amostras

• Para amostras clínicas, siga as técnicas observadas para o interesse das amostras, de acordo com as diretrizes condicionais (4,5).
• Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas detalhadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (6,9,10).
• Para amostras de água, siga as técnicas de coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes e os padrões locais. (1)
• Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e Precauções

• Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção / vestuário de proteção / olhos proteção / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes condicionais devem ser seguidas durante o tratamento de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas nas fichas de dados de segurança individuais.

Limitações

• 1.Para identificação, os organismos devem estar em pura cultura.
• 2. Devem ser realizados testes morfológicos, bioquímicos e/ou sorológicos para identificação final.

Desempenho e Avaliação

• O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado à temperatura recomendada.

Controle de qualidade

• Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre
• Cor e claro do meio preparado: Solução de cor amarela clara, sem precipitado
• Reação: Reação de solução úmida a 3,7% p/va 25°C. pH: 6,9 ± 0,2
• pH: 6,70-7,10

Resposta cultural

• Características culturais observadas após uma incubação a 44,5°C ± 0,2 por 24 horas.

Organismo

• Klebisiella pneumoniae ATCC 13883 (00097*)
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Bom-Exuberante
• GÁS: Reação Positiva
   

Organismo

• Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*)
• Inoculação: 50-100
• Crescimento: Justo-Bom
• GÁS: Reação Negativa

Organismo

1. Enterococcus faecalis ATCC 29212
2. Inoculação: >=10³
3. Crescimento: Inibido
4. GÁS: -

Organismo

• Bacillus spizinii ATCC 6633 (0003*)
• Inoculação: >=10³
• Crescimento: Inibido
• GÁS: -

Organismo

• Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
• Inoculação: >=10³
• Crescimento: 50-100
• GÁS: Reação Positiva
   

Organismo

• Klebisiella aerogenes ATCC 13048 (00175*)
• Inoculação: >=10³
• Crescimento: Inibido
• GÁS: -

Armazenamento e prazo de validade

• Armazenar abaixo de 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 15-25°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em área ventilada e seca, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte

• O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de detalhado usado ou não utilizável deste produto. Seguem procedimentos laboratoriais projetados para eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (4,5).

Referências

• 1. Baird RB, Eaton AD e Rice EW, (Eds.), 2015, Métodos Padrão para o Exame de Água e Wastewater, 23a ed., APHA, Washington, DC
• 2. Fishbein M. e Surkiewicz BF, 1964, Appl. Microbiol., 12: 127.
• 3. Hajna AA e Perry CA, 1943, Am. J. Saúde Pública, 33: 550.
• 4.Isenberg, HD Procedimentos Clínicos de Microbiologia. 2ª Edição.
• 5. Jorgensen, JH, Pfaller, MA, Carroll, KC, Funke, G., Landry, ML, Richter, SS e Warnock., DW (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1
• 6. Lapage S., Shelton J. e Mitchell T., 1970, Methods in Microbiology', Norris J. e Ribbons D., (Eds.), Vol. 3A, Acadêmico Press, Londres.
• 7. Marshall, (Ed.), 1993, Métodos Padrão para o Exame de Produtos Lácteos, 16ª Ed., American Public Health Association, Washington, DC
• 8. Ray B., 1986, J. Food Prot., 49: 651. 6. Rice EW, Baird, RB, Eaton AD, Clesceri LS (Eds.), 2012, Métodos Padrão para o Exame de Água e Águas Residuais, 22ª ed., APHA, Washington, DC
• 9. Salfinger Y. e Tortorello ML Fifth (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos, 5ª Ed. Associação Americana de Saúde Pública, Washington, DC
• 10. Wehr HM e Frank JH, 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17ª Ed., APHA Inc., Washington, DC